Análisis de los dominios funcionales del receptor de progesterona en líneas celulares estables de cáncer de mama

Quiles Lara, Ignacio

Análisis de los dominios funcionales del receptor de progesterona en líneas celulares estables de cáncer de mama

Document Type

Doctoral thesis
Published Version

Author

Quiles Lara, Ignacio

Director

Jordan Vallès, Albert
Beato, Miguel

Publication Date

2007-09-07

Citation

Quiles Lara, I. Análisis de los dominios funcionales del receptor de progesterona en líneas celulares estables de cáncer de mama. Universitat Pompeu Fabra; 2007. handle: http://hdl.handle.net/10803/7178

This citation was generated automatically.

Doctoral program

Programa de doctorat en Biomedicina

Abstract

Esta tesis se interesa por distinguir entre los efectos directos de los receptores nucleares y aquellos mediados por las rutas de transducción de señales en la transcripción de genes en respuesta a hormona y proliferación celular. Para esto, nosotros hemos expresado establemente en una línea celular T47Dy desprovista de PR, formas variantes marcadas de la isoforma B del PR en regiones involucradas bien en la unión al DNA(PRB-DBD), en su habilidad para interaccionar con ER y activar la cascada c-Src/Erk (PRB-ERID), o la incapacidad de reclutar coactivadores. La expresión génica en respuesta a progesterona en líneas celulares expresando los PRB salvaje y mutantes ha sido estudiada un microarray con 750 genes de cáncer de mama. Los resultados definen conjuntos de genes regulados en respuesta a hormona por los diferentes modos de acción del PRB, también genes dónde las rutas nucleares y no genómicas cooperan. Por último, se ha centrado la atención en la participación del gen Ciclina D1 (CCND1) en proliferación celular por hormona, el modo de acción del PR en su activación y el análisis de las regiones promotoras dónde PR se une.
This these is interested on distinguishing between direct effects of nuclear receptors and those mediated by signal transduction pathways on transcription of hormone-responsive genes and cell proliferation. For this, it stablies expressed in the PR-negative T47Dy breast cancer cell line, tagged forms of the PRB mutated at regions involved either in DNA binding, in its ability to interact with ER and activate the c-Src/Erk cascade, or the recruitment of coactivators. Gene expression in response to progestins in cell lines expressing wild type or mutant PRB has been studied by a 750 genes-containing breast cancer customized cDNA microarray. Our results define the subsets of hormoneresponsive genes regulated by the different modes of action of PRB, as well as genes where the nuclear and nongenomic pathways of PRB cooperate. Finally, it has focused the attention on the involvement of Cyclin D1 gene (CCND1) activation by hormone on cell proliferation, the mode of action of PR on its activation and the analysis of promoter regions where PR binds.

Keywords

ligand binding domain, dimerization, binding domain, DNA, nuclear receptor, progesterone receptor, breast cancer cells, ciclina D1 (CCND1), MAP quinasa, rutas genómicas & no genómicas, genes de respuesta a rrogesterona, P-Box & D-Box, dimerización, dominio de unión a ligando, receptor de progesterona, dominio de unión a DNA, receptores nucleares, células de cáncer de mama, P-Box & D-Box